1. DENGUE:
Visión del Laboratorio
Mariela van der Wekken
Serologia - HIGA

2. Epidemiología

3.  Principales problemas de Salud pública en todo el
mundo.
 80 millones infectados anualmente, 20 mil mueren.
Enfermedades producidas por Flavivirus
→”Infecciones ReEmergentes”
 Expansión del Vector y la diseminación del Virus
dengue y su forma grave: DH/SCHD.

4. El Virus DENGUE

5.  RNA, simple cadena 11 Kb.
 3 proteínas estructurales y 7 proteínas no
estructurales.
 Familia Flaviviridae, Genero Flavivirus.
 4 Serotipos: DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4.
 Dengue Clásico vs Dengue Hemorrágico
(DH) / Síndrome de Choque por Dengue
(SCHD).

6. Síntomas

7. • Fiebre acompañado de:
Dolor de cabeza y retro ocular
Perdida de apetito
Nauseas, vómitos
Dolores musculares y articulares
Erupción de piel
• DH: manifestaciones hemorrágicas.
↑permeabilidad vascular .
• SCHD: Hipotensión,
↓circulación periférica (piel fría),

8. Transmisión

9.  Hembras de Aedes aegypti.
 Persona Insecto Persona.
 Mayor actividad durante el día.
 Combatir Mosquitos, Larvas y Huevos.
 Ciclo en condiciones óptimas; 10 días.

10. Ciclo de vida del Dengue

11. http://www.youtube.com/watch?
v=UVxvtZ0Er9Y&feature=player_detailpage

12. Patogenia

13.  Periodo de Incubación: 7-10 días.
 Replicación viral: máxima 2-3 días antes de los
síntomas y desaparece al 5 día.
 Inmunidad a un Serotipo y de “Larga duración”
 2 Rtas. Serológicas:
*PRIMARIA: No inmunes a Flavivirus
*SECUNDARIA: Ya tuvieron contacto con
Flavivirus.

14. Datos a tener en cuenta

15.  Síntomas.
 Viaje a áreas de brote autóctono.
 Hepatograma alterado.
 Leucopenia y Plaquetopenia.
 Vacuna Fiebre amarilla.
 Si tubo alguna vez Dengue.
 Manifestaciones hemorrágicas.

16. Tratamiento

17.  No existe Tratamiento especifico.
 No existe Vacuna efectiva.
 No dar Aspirina!!.
 Aumento de Líquidos, dieta normal.
 Reposo absoluto, Aislamiento con mosquiteros.
 Las complicaciones DH/SCHD aparecen al 3-5 día
cuando ya desapareció la fiebre.

18. Prevención

19. Huevos, y larvas pueden vivir en colecciones
pequeñas de agua.
 Huevos son muy resistentes.
 Evitar elementos que contengan agua.
 Uso de Repelentes, Mosquiteros
 Uso Manga Larga, pantalones largos.

21. Situación Epidemiológica Argentina

22.  Erradica Vector década ’60.
 Reinfestacion 1986 en NE y primer epidemia en
1998 en Salta por serotipo 2.
 2006-2008 casos autóctonos en Corrientes,
Formosa, y Salta. Serotipos 1,2 y 3.
 2009 miles de casos(+) NO y NE. Casos
autóctonos Pcia. Buenos aires.
 Enero-4Abril 2009 INEVH por RT-PCR solo DEN-
1.

23. DIAGNOSTICO POR EL
LABORATORIO
DENGUE

24. “La elección del Método de Diagnostico a emplear,
depende de los días de evolución de los síntomas:
Periodo Agudo Periodo Convalecencia
1 a 4 días 5 a 21 días
Búsqueda del Virus Búsqueda de
Anticuerpos
Métodos Directos Métodos Serológicos

25. Métodos Serológicos
Se basan en la búsqueda
de los anticuerpos.
Luego del 5° día.

26.  “Los Flavivirus pueden dar reacción cruzada en las
serologias haciendo mas difícil el diagnostico”
Rta. Serológica en la Infección Aguda:
→ PRIMARIA: SIN contacto con Flavivirus
Acs. Principal/ IgM.
→ SECUNDARIA: contacto con Flavivirus.
Acs. Predomina IgG
Rta. Inmune mas importante.

28. A) Inhibición de la Hemaglutinación (IH)
• Principio: Virus dengue aglutina GR de ganso, que se
puede I(-) con la presencia de acs anti-Dengue.
• Ventajas: confiable / equipo mínimo.
• Desventajas: Laboriosa / 2 muestras de suero
Rx. Cruzadas / mayor tiempo.

29. B) Neutralización (NT)
• Ventajas: * Sensible / Especifica.
* Única que permite diferenciar Serotipo.
• Desventajas: * 2 muestras pareadas.
* tiempo. No apto para rutina
* Determina Acs. Totales.

30. C) ELISA de captura IgM (MAC-ELISA)
• Principio: Captura de anticuerpos IgM del suero utilizando
anti-IgM humanas U a la fase sólida.
• Ventajas: Rápido / Sencillo.
Rx. Cruzadas / Especificidad.
Poco volumen de suero / Económico.
Incluye los 4 serotipos: Sensibilidad.

31. D) ELISA IgG
• Desventajas: Sueros pareados
Rx. Cruzada con otros Flavivirus.
E) Test Diagnostico Rápido (RDT)
F) ELISA para IgA

32. Métodos Directos
Se basan en la búsqueda
del antígeno o virus.
Antes del 5° día.

33. A) Aislamiento Viral
• Ventajas: Especifico
Método de Referencia.
A.1) Inoculación Intratoracica de Mosquitos
A.2) Inoculación Células de mamíferos.
A.3) Inoculación en células de Mosquitos.

34. B) Detección de Ac. Nucleicos (RT-PCR)
• Ventajas: Mas fácil y rápido que el Aislamiento
Viral.
Especifico de Serotipo.
• Puede usarse DOT-BLOT con sondas radioactivas
C) Detección de Ag Viral (Inmunohistoq)
• Ventajas: Mas fácil y rápido que el Aislamiento
Viral.

35. Toma de muestra
y Envío.
Con la muestra
adjuntar la
“Ficha Epidemiológica”

36. Suero Mantener a 4° por 48 hs.
Mantener a -20° por mas de 72 hs
Muestra 1 a -70°.
Tejidos Muestra 2 a T°amb. Fijado en
formol o parafina.
Mantener a 4° por 48 hs.
LCR Mantener a -20° por mas de 72 hs

37. Algoritmo de Redes
Laboratorio para dengue
Contexto epidemiológico actual. Argentina.
Circular Marzo 2009

38. Manejo en Áreas epidémicas y
No Epidémicas
“Para un adecuado uso
de los Recursos, se plantea
ésta Metodología de
trabajo”.

39. Áreas de Epidemia
 la Confirmación por Laboratorio de cada caso sospechoso
significa “un mal uso de recursos”.
cuadro + Nexo CASO DENGUE
compatible Epidemiol.
 Solo se estudiarán un pequeño n° de esos casos, para
analizar:
duración del brote, vigilar nuevos serotipos, todos los casos fatales,
etc.

40. Áreas no Endémicas
 El trabajo del Laboratorio se centra en la vigilancia e
identificación de nuevas zonas hacia donde se propaga la
enfermedad.
Se estudiara cada caso sospechoso.

41. 3 Htal. “San Juan de
LAB.Referencia Dios. La Plata.
Provincial
Htal. “Evita Pueblo”
(Serologia ELISA Berazategui.
IgM)
Provincia Htal.”Cordero” San
Buenos Aires Fernando
LAB.Referencia
Nacional.
INEVH (BM,
aislamiento)
PROVINCIAS SIN Directamente
LABORATORIOS DE RED INEVH

42. Algoritmo vigilancia epidemiológica sin
Brote
Enf. Febril aguda con Epidemiologia (+)
2 o + sintomas
Caso sospechoso
Toma y envio de muestras Notificacion a autoridades
(serologia) sanitarias
NEG(-) POS(+)
Diagnostico Serologico Confirmatorio
(2º muestra IgM)
NEG(-) POS(+)
descartar otra etiologia caso dengue confirmado

43. Bibliografía.
 “Evaluation of Commercially Available Anti-Dengue Virus
Immunoglobulin M test”. Emerging Infectious Diseases. CDC,
March,2009, Vol.15 Nº3
 “Situacion epidemiologica del Dengue en America. Desafios
para su vigilancia y control”.Clark. 1995. Salud Publica
Mexico, 37 supl: 5-11.
 “Plan Provincial de Contingencia para Dengue”. Pcia, de
Buenos Aires. Ministerio de Salud. Marzo 2009
 “Algoritmo de Trabajo de la red de laboratorios de Dengue”.
INEVH-ANLIS. Pergamino, Abril,2009.
 “Criterios Clinicos para DiagnosticarDengue en los primeros
dias de la enfermedad”. Diaz. Martinez y Villar.
Colombia. Revista Biomedica.2006

44.  “Dengue. Diagnostico por el Laboratorio”. Ospina. Asociacion
Colombiana de Infectologia. 2004.
 “Apuntes sobre el Diagnostico de Laboratorio del Virus Dengue”.
Guzman y Vazquez: Instituto “Pedro Kouri”. Revista Cubana de
Medicina Tropical.2002

45. ¡¡Gracias
por
su
atención!!